周祖培（1793年－1867年），字叔滋，号芝台，河南商城（现属安徽金寨汤家汇镇）人，祖籍江西婺源，晚清大臣，历仕嘉庆、道光、咸丰、同治四朝。
嘉庆二十四年（1819年）己卯恩科进士，选庶吉士，散馆授编修。道光十七年（1837年）督陕甘学政，历侍读学士、詹事、内阁学士。道光二十三年（1843年）擢礼部侍郎，调工部，又调刑部。道光二十六年（1846年）偕户部尚书赛尚阿查勘江南江防善后事宜，校阅江苏、安徽、江西营伍。咸丰元年（1851年）擢刑部尚书。咸丰三年（1853年）要犯刘秋贵死于狱，承审官未得实情，周祖培坐降三级调用，授左副都御史，历工部、吏部侍郎。咸丰四年（1854年）连擢左都御史、兵部尚书，兼管顺天府尹。咸丰六年（1856年）加太子太保，调吏部。咸丰八年（1858年）会办五城团防，以吏部尚书协办大学士，兼署户部。咸丰九年（1859年）调户部尚书，兼署吏部。
咸丰十年（1860年）英法联军入侵，京师戒严，咸丰帝避走热河，命周祖培留京办事，拜体仁阁大学士，管理户部。咸丰十一年（1861年）帝驾崩，命总理丧仪，兼办定陵工程。及同治帝奉两宫回銮，疏言“祺祥”年号意义重复，请更正。周祖培加入了东太后慈安、西太后慈禧和奕䜣的祺祥之变，消灭肃顺的顾命八大臣集团，又与大学士贾桢、尚书沈兆霖、赵光等疏议，列举历代皇后协助幼帝的历史，由山东道监察御史董元醇奏请东西太后一起垂帘听政。同治元年（1862年）调管刑部。同治六年（1867年）卒于北京，赠太子太保，谥文勤。
