随机引子标记

✍ dations ◷ 2025-02-23 10:35:24 #随机引子标记

随机引子标记（英文：Random-Primed Labeling）是种分子生物学技术，可用于在DNA探针上加上可作为讯号识别的标记。

先将欲标记探针片段加热，使其变性双股分离成单股，接着加入随机引子并降温使其和单股黏合(通常是hexonucleotides)。再以Klenow片段将接有标记分子的dNTP如Digoxigenin(地高辛)、Biotin(生物素)或萤光分子如Cyanine用来合出互补股，就可得到掺有标记物的探针。

Digoxigenin之后可用Anti Digoxigenin(一级抗体)接合再以标有萤光酵素(HRP或AP)的Anti Digoxigenin Antibody(二级抗体)接合一级抗体，并加入萤光酵素受质即可发出萤光，再以冷光仪或分光光度计测吸光值。

而Biotin可与接有萤光酵素的Streptavidin结合，并如同上面加入萤光酵素受质测吸光值。

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