哥伦布首航舰队是指哥伦布于1492年－1493年，奉西班牙王室命令，首次航行至美洲的舰队。舰队筹建费200万马拉维迪铜币，航程约1.6万公里，历时224天后解散，途中建立了欧洲人在美洲大陆的第一个殖民地。
哥伦布首航舰队的筹备过程并不容易，哥伦布曾先后走访了葡萄牙、英国、法国等等国家，却一直得不到任何一个政府的支持。西班牙王室也因为正在进行收复失地运动，与伊斯兰势力进行战争而无暇分心。在这情况下，哥伦布一度萌生放弃的念头。西班牙王室后来成立了专案委员会研究成立哥伦布首航舰队的可能性，却一度否决了这个计划，直至第二次委员会通过以后，哥伦布有因为跟西班牙王室就发现地利益问题而无法达成共识。最后哥伦布在出走西班牙时，王室才快马追回哥伦布，答应他的全部要求，哥伦布首航舰队才得以成立。
这支舰队包括旗舰圣玛利亚号、轻快帆船尼尼亚号和轻快帆船平塔号。
据航海日记的记载，哥伦布首航舰队的主要武器是剑和火枪。哥伦布首航舰队使用了意大利地理学家托里堪内里于1470年绘制的海图，此海图上，在大西洋的西方印有通往日本的航线。哥伦布首航舰队配备了指南针，在大多数时候都可以透过指南针和星座定位。另外，哥伦布首航舰队上也装备了大量的食水，酒和食物，以备远航之用。
舰队旗舰圣玛利亚号于航程中沉没，而其余两条轻快帆船也于1493年3月15日回归西班牙的始发港帕洛斯港后被解散，其中尼尼亚号继续被受哥伦布的重用，在哥伦布往后的航程中一度成为哥伦布的旗舰，而平塔号则从始不再见于史册之中。
舰队虽然没有为西班牙王室完成发现至亚洲的新航道的任务，却成功地发现了美洲大陆，并建立了欧洲人于美洲大陆上的第一个殖民地，为后来的地理大发现翻开了新的一页，更是欧洲第一支美洲殖民海军。哥伦布成为风靡一时的人物，欧洲人民也争相抢购舰队的航海日记，其发现立即激发了葡萄牙王对西航的兴趣，并于其后引致了葡、西、荷、法、英等欧洲国家的殖民热。哥伦布的发现促成了世界诸文明的融合，构成了现代文明的基础，推动了全球一体化的步伐。
舰队的航程无意中发现了美洲大陆，这为美洲的原住民带来了巨大的改变。舰队回归西班牙以后，引发了更多的欧洲人去美洲，为美洲带来改变。传教士尝试让美洲人归宗天主教，欧洲人又从美洲拿去了大量的金、银等资源，大量的哥伦布交换（Columbus Exchange），为美洲带来了新的物品和物种。另外，哥伦布误认美洲为印度，也令到美洲原住民有了印第安人的称号）。
舰队的航程为欧洲带来了新的物产，包括玉米、马铃薯等，为欧洲人带来了更多和不同的食物和营养。另外，金银的流入，造成了一系列的价格革命。舰队作为第一支美洲地区的殖民海军，一时为西班牙带来了一段繁荣的阶段，但其更深远的影响是他的航程也激发了欧洲人对殖民美洲的兴趣，促进了帝国主义在欧洲各国之间的发展。
