偶氮胂Ⅲ,又名铀试剂Ⅲ,是一种铬变酸的双偶氮化合物,常作为分析化学试剂。
由于分子较大但有易解离的羟基氢,因此本品微溶于水而可溶于碱。在酸性溶液(10mol/L HCl~pH3)中呈紫红色或红色,pH4以上呈蓝或紫色。水溶液长期稳定。
在酸性溶液中,偶氮胂Ⅲ的最大吸收波长为540nm。但当其与一些稀土离子配位时,其吸收峰会发生变化,移动到约650nm处,而这一变化可使用分光光度法观测到,这也是偶氮胂法测定稀土离子浓度的基础。为提高灵敏度,可加入少量乙醇。一般的,偶氮胂与大阳离子(如La3+)形成1:1配合物,这些配合物的解离常数都很高;而小金属阳离子(如Cd2+)则形成2:1配合物,且不如前者稳定。
测定血清钙时也可用该试剂,优点是较为灵敏,缺点是有机砷有较大毒性,因而限制了应用。
一般认为主要是砷酸根上的氧进行配位。在pH处于0-7.4之间时,偶氮胂的吸收峰不会发生变化,尽管这时砷酸基上的氢已解离。但在pH更高时,酚羟基开始解离,并造成吸收峰向更长波长移动。在pH为14时,吸收峰会移动到580 nm处。这时,两个酚羟基氧和四个砷酸根氧都可参与配位。但上述条件下金属离子多以氢氧化物形式存在,且砷酸并不难以解离(四个羟基的pKa有两个是2.3,另两个是5.3),故一般使用2-9 mol/L盐酸(也可用3 mol/L高氯酸)进行检验。