周昌（？－前192年），汉朝大臣，泗水郡沛县人，周苛从弟。为人正直，楚汉战争时有军功，刘邦登基，封周昌为汾阴侯，官御史大夫。为人强悍有力，敢于直言，萧何、曹参等高官都非常尊敬周昌。周昌曾力保刘盈（惠帝），劝阻刘邦立赵王刘如意为太子，刘邦反而封周昌为赵国国相，辅佐刘如意，希望日后刘如意不被吕后所害。刘邦死后，吕后果然想杀刘如意，但周昌多次保护使吕后不能得逞，吕后大怒，把周昌扣押之后，再召刘如意而杀之，周昌认为辜负了刘邦的遗命，忧郁而病死，谥号悼。
秦朝为泗水郡卒史，秦末民变，刘邦占据沛县造反，称沛公，周昌投奔刘邦，担任“职志”军官，负责掌管军旗。
项羽灭秦，分封十八路诸侯，刘邦封为汉王，周昌为中尉。汉王四年（前203年），从兄御史大夫周苛坚守荥阳，被项羽烹杀。刘邦感念周苛，以周昌代职，拜为御史大夫。
刘邦统一中国之后，依照功臣之功劳等第，封十八位列侯，周昌排行第十六，为汾阴侯，但居功第一的酂侯萧何，第二的平阳侯曹参乃至于文武百官，对周昌都非常恭敬。
有一次周昌奏事，却没想到刘邦与正在戚夫人欢好，周昌掉头就走，刘邦却追上周昌，骑在他的脖子上，问周昌：“我是怎样的君主？”周昌大骂：“陛下是桀纣一样的暴君。”刘邦表面大笑，但是心里很敬畏周昌。
刘邦想废黜太子刘盈，立赵王刘如意。周昌很生气，拒不奉诏，说话口吃：“臣口不能言，然臣期......期知其不可。陛下虽欲废太子，臣期......期不奉诏。”刘邦大笑，最后没有废黜太子。
当时精通面相的方与公对周昌说：“您的部下符玺御史赵尧，年纪虽小，但却是个奇才，皇上一定会特别对待他的，以后他会取代您御史大夫的位置。”周昌则笑说：“他不过是个作文书的年轻刀笔吏而已，怎么可能达到如此的官位呢？”
汉高祖九年（前198年），刘邦闷闷不乐，但群臣都不知道缘故，赵尧问刘邦：“陛下之所以忧虑，大概因为戚夫人之子赵王刘如意年幼，而戚夫人与吕后有怨，陛下心中恐怕千秋万世之后，如意会被吕后所害？”，刘邦说：“我非常忧虑这个，但没想到办法。”赵尧献计说：“陛下应该立一位地位尊贵，性格强悍的赵国国相来保护赵王，还要吕太后与各大臣长久以来都很敬畏的人才行。”刘邦问赵尧谁适合做人选，赵尧推荐了周昌。刘邦遂把周昌改任为赵国的国相，并把周昌御史大夫的遗缺给了赵尧。周昌哭着说：“臣本来就是陛下起兵时的旧臣，何必半途流放到诸侯之地呢？”刘邦说：“我完全了解这是贬官，但是我很担心赵王的安危，才拜托您帮我辅佐赵王。真的不得已，您勉强去罢！”
刘邦去世后，吕太后数次召刘如意入朝廷，打算杀了他。周昌也屡次向汉朝的使节拒绝，称“赵王体弱多病，不能出远门”拒绝。吕太后一怒之下，于是把周昌调回长安，非常生气地骂他：“难道你不知道我非常恨戚氏吗？而你为什么不让赵王进京？”周昌被召进长安之后，太后又派使者召赵王，赵王只好入朝廷，一个多月，就被吕后赐死，因周昌曾经支持过刘盈为储君，吕后没有处罚周昌。
周昌自觉辜负刘邦，郁闷不乐，三年后去世，谥号悼。
周昌说话口吃，曾说“臣期期知其不可....臣期期不奉诏....”三国时期，曹魏名将邓艾也是口吃，动不动就“艾、艾……”，因此周昌与邓艾的事迹就简化成一句成语“期期艾艾”，形容人口吃的样子。
