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双杂合系统
✍ dations ◷ 2025-02-23 17:53:39 #双杂合系统
酵母菌双杂合系统,英文为Yeast two-hybrid system,亦简称Two-hybrid screening,是一种研究蛋白质交互作用
或蛋白质和DNA交互作用的实验技术。此系统的基本原理是报导基因上游的启动区域与转录因子结合后,使下游的报导基因表现。在酵母菌双杂合系统中将转录因子设计为结合区(Binding domain, BD)和活化区(Active domain, AD),结合区可与基因上游的启动区域结合,活化区负责活动下游报导基因开始转录。1989年Fields and Song率先开发出这项技术来研究蛋白质间的交互作用,他们最早使用的是Saccharomyces cerevisiae这种酵母菌的GAL4表达系统,这种利用半乳糖影响基因表现原理,来进行研究蛋白质和DNA交互作用、DNA间交互作用的筛选技术,在大肠杆菌中有更多的应用。
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