大蛇丸（大蛇丸，Orochimaru）是日本动漫《火影忍者》中的三忍之一，是故事前期最重要的反派角色，为了自己的利益在不同组织之间来回工作，后来回到木叶阵线之中，对禁术颇有研究。
大蛇丸的名字来源于30年前的日本民间故事《自来也豪杰物语》。大蛇，顾名思义就是巨大的蛇。因此，对于大蛇丸来说，召唤万蛇是顺理成章的事。至于“オロチ”这个词语，则是来自日本传说中的八岐大蛇。“マル”在日本常用来命名男孩或船舰，如战国时的森兰丸。
在第二场考试中，大蛇丸冒充成草隐村考生，伺机对佐助下了天之咒印，然后让受他指使的音隐村考生（对大蛇丸来说只是棋子）对佐助下手。
五十岁时他跟木叶的原盟友，第四代风影结盟，二人合谋攻击木叶，其行动称为“木叶崩溃行动”。他以药师兜等三人作音忍间谍潜入木叶忍者村，同时他又杀了参与中忍考试的三名草忍，和两名部下部下以他们的名义混入中忍考试。并于死亡森林中遇到鸣人一行人，曾以嘉露伊微的实力短暂与他们交手，测试他们的实力。由于打算以宇智波佐助的身体作转生容器，故给了佐助天之咒印，并预言佐助将会为报宇智波一族被灭之仇去找他寻求力量。
后来他暗杀第四代风影，并伪装成风影，让自己完全控制砂忍的行动。他成功挑动起砂忍和木叶忍者之间的战斗后立时撕下伪装，在音忍四人众所维持的结界里以苦无挟持第三代火影佯装要直接杀掉他，结果大蛇丸却忍不住流出泪来并刺伤自己的手，第三代火影认为杀害老师的他还是会伤心，大蛇丸则声称只是因为打呵欠才会流泪，随后向第三代火影发出挑战。
二人交战时初时不分上下，于是大蛇丸以秽土转生禁术，召唤出初代和二代火影灵魂寄附在自己两名部下的身体里，跟自己合击第三代火影。在初代、二代和大蛇丸同时夹击下三代亦通灵出猿猴王猿魔助战，但是仍然无法击败对方。就在三代犹豫时，大蛇丸突然发笑，随后现出自己当前的真面目（在动画中，他的声音同时变成女声），应证了他的灵魂转生术已经成功，并夺取了别人的身体为己用。此前他脱离晓时在宇智波鼬一战中失去左手，而在第三代火影对战时经历转生而双手齐全。第三代火影见往日的弟子已经走火入魔，决定清理门户。
为了彻底封印初代和二代并杀死大蛇丸，三代只好付出了自己的灵魂给死神作代价，与两个影分身使用禁术"尸鬼封尽"，召出死神以同归于尽的方式将初代、二代火影封印，由于三代火影剩余的查克拉不够，未能完全封印大蛇丸，只封印了他的双手。
他的双手被封印后，失去了使用忍术的力量（因为秽土转生以及多数的忍术都必须以手结印才能够使出），大蛇丸只好带领音忍彻退。其后砂忍才知道真正的风影已被大蛇丸所杀，只得跟木叶重订和约。最后大蛇丸这场“木叶崩溃”行动以失败告终，但砂忍者村和木叶的战力也因此受挫。
大蛇丸为了医治双手，他和手下兜主动去通册街找三忍的医疗圣手－纲手请求诊治。由于纲手态度强硬，大蛇丸以替纲手死去的弟弟和情人复活（即秽土转生禁术）作交易条件，并以七日为限期。七日后双方再次交涉，但大蛇丸受纲手背叛，幸得兜及时制止，纲手也决心杀死两人展开追逐战……
之后大蛇丸因受不了双手被封印所带来的痛苦，故加紧派音忍四人众前往劝诱佐助投靠音隐村。佐助到来前，大蛇丸临时以所捕忍者幻幽丸的身体进行灵魂转生。后来牺牲了音忍四人众及拥有血继限界的君麻吕，让佐助来到音隐村，并积极对其进行培训，企图用佐助作为下一个容器。
三年后，木叶村的大和班从‘晓’的蝎处得到消息，知道其派往大蛇丸的卧底将于天地桥处跟其会面，并欲借此找到关于佐助的线索。鸣人一众按照指示到达天地桥，却遇上了大蛇丸。大蛇丸跟因愤怒而化成四尾妖狐的鸣人进行了一场激烈的殊死战（兜称这为‘怪物间的战斗’），及后却因身躯已达极限，故带同兜及团藏派来交涉的佐井一起离开。
但大和班没有放弃，追踪至大蛇丸的巢穴，找出并成功劝告佐井归队。之后他们分成两队，以求加快寻找出佐助的位置。途中佐井及鸣人一队却碰上了大蛇丸，大蛇丸跟鸣人再度交手，而鸣人却让佐井先往寻找佐助。后小樱及大和前来支援，大蛇丸不欲战斗而遁去无踪。
不久，鸣人、小樱跟佐助再度会面，但佐助却不领旧情，欲把他们全部杀掉。这时大蛇丸突然出现，出奇地阻止佐助杀死鸣人他们，因为大蛇丸认为他们还有利用价值，可替他多杀掉几个‘晓’的成员（因为大蛇丸曾是‘晓’的成员，后叛离而同时被‘晓’追杀）。佐助会意而放弃杀害鸣人们的念头，和大蛇丸一起施展幻术，随风消逝。
曾想利用“三尾”幽鬼丸得到三尾力量，但被鸣人等人阻止，最后失败放弃。而三尾则被‘晓’的成员带走。
大蛇丸的身躯逐步迫近三年界限，连兜的药石也已无助，认为是时候以佐助的躯体进行灵界转生。另一边佐助认为大蛇丸该教他的全都学会了，大蛇丸的存在对他来说已经没有利用价值，故先发制人，冲进其房间进行刺杀。大蛇丸也不甘示弱，现出白鳞大蛇真身，并即席进行灵界转生。然而他却在自己进行转生的结界内被佐助反吞噬夺去一切力量，面临消失时回想起年嘉露伊时与三代火影之间开启他追求永生的对话，最终仅留下一副大蛇躯壳，后药师兜把其剩下的躯壳移植到自己的左手，渐渐掌控与大蛇丸形式相近的力量。
吞噬大蛇丸的佐助，终于跟兄长宇智波鼬重遇，并进行了宿命生死一战。然而就在此际隐藏在佐助体内的大蛇丸透过咒印取回自己被夺的力量，趁佐助力量虚耗之际使出“八歧之术”变化出八歧大蛇。但最终仍为宇智波鼬的绝招‘须佐能乎’所克制，大蛇丸连同八歧大蛇被宇智波鼬以十拳剑封印并将其吸进酒葫芦的空间
虽然被宇智波兄弟击败，但大蛇丸并未完全从忍者世界消失，忍战后期佐助要重吾取下兜身上一部分的大蛇丸细胞，结合御手洗红豆身上的天之咒印，施解邪法印后成功将大蛇丸复活，大蛇丸表示对这次的忍界大战毫无兴趣，但愿意帮助佐助，解除了兜的仙人模式并取回自己的查克拉后与鹰小队同行，其后找出漩涡一族的面具，前往宇智波一族的南贺神社，解除尸鬼封尽恢复双臂，同时以白绝分身作为祭品，秽土转生召唤出历代火影，自己的身躯也再次获得重生。
经过一轮与历代火影的问话后，佐助决定拯救木叶，而大蛇丸亦决定站在木叶阵线。他与香磷，水月等人前往纲手等五影所在处，协助纲手快速回复元气。
大蛇丸倒戈帮助木叶的原因解释得并不多，被师父三代目问到时回应：“在兜体内的那段时间我明白了，兜模仿着我处心积虑的一切最终还是失败了，如今对佐助不一样的人生充满兴趣。”；纲手问及他为何会帮助木叶时则说：“之前的我想化身为风（有影响力的人），去推动风车（忍者世界）转动；可是时间久了，耐心等待不知何时刮起的另一阵风（佐助），也是乐趣所在。”他还认为人是会变的，可能是死过两个身体的缘故，他对于自来也的死感到惋惜。
他曾在与火影们的对话中，消遣自己的师父三代目，对于他选择波风水门而非他为下一任火影感到遗憾。
最后没能逃过斑的无限月读，同样陷入其中。其后佐助和鸣人解开无限月读，大蛇丸和兜等人站在一块，望向同个方向。
辉夜一战结束后，大蛇丸回到自己的基地，在木叶忍者村的追踪和监视下进行他的研究。在鸣人结婚前夕，大蛇丸已能在大和监视的前提下于村子里自由行动，并让木叶丸录制结婚贺影和在烤肉店打工，变成背景搞笑角色。在佐助秘传时则是回到自己的研究基地，并协助佐助调查血龙眼事件。鸣人在任七代目火影时，大蛇丸因研究有成，外貌变得更加年嘉露伊。博人的好友巳月是他制作出来的人造人，可以说是他的父亲/母亲。
大蛇丸据情报所悉召来佐助，告知佐助木叶忍者村被空忍袭击一事，要佐助带回曾赐予他再生禁术、已经修练完成且是位医生的恩人，佐助马上联想到大蛇丸所言之人正是空忍首领神农。事后佐助带回一个忍术卷轴交予大蛇丸，佐助没能把神农带回来一事被兜评为少见的失误，敏锐的大蛇丸似乎感受到佐助遇上了好事。
大蛇丸仅在片尾彩蛋中出现约一秒钟，没有任何台词。在巳月揭露自己是大蛇丸的孩子时，大蛇丸站在高处俯瞰博人、莎罗娜和巳月。
