反义RNA（Antisense RNA, 常缩写为asRNA），是一种与转录产物mRNA（信使RNA）互补的单链RNA。部分学者亦将这类RNA称为“micRNA”（mRNA干扰互补RNA，英语：mRNA-interfering complementary RNA），但此名称并未得到广泛使用。
反义RNA可通过与mRNA结合来抑制转译的进行。可通过化学计量来测定反义RNA的抑制效果。大肠杆菌的R1质粒上的hok/sok 系统（英语：hok/sok system）就是反义RNA抑制转译的一个实例。反义RNA有很大的作治疗疾病的药物的潜力，惟目前此类药物只有福米韦生进入市场。一位评论员这样认为：“反义RNA牵扯到一大堆技术，看上去‘很华丽’，但商業價值却低得可怜。”一般来说，目前设计反义RNA（药物）的效率仍然不高，相关药物的生物活性也不高。目前也没有找到高效的给药途径。
反义RNA的起效与RNA干涉（RNAi）有关。只有真核生物具有RNA干涉过程。反义RNA和相应的mRNA形成双链RNA片段为RNA干涉过程的第一步。随后，DICER酶（英语：Dicer）能将上述的双链RNA切成小段。这些小段的反义RNA链紧接着会与RNA诱导沉默复合体（RISC）结合，之后，后者便会与小段上的mRNA链连接，并将之降解。一些转基因植物因能表达反义RNA，RNA干涉途径处于激活状态。因为反义RNA的表达，RNA干涉会导致不同程度的基因沉默。比较著名的例子有Flavr Savr（英语：Flavr Savr）番茄以及两种耐环斑（英语：Papaya ringspot virus）的番木瓜。
长顺式反义RNA的转录在哺乳动物中十分常见。尽管一些上述的反义RNA的功能已被阐明，比如Zeb2/Sipl反义RNA，但目前尚未发现这类RNA的一般功能。Zeb2/Sipl这一反义RNA在DNA上的对应区域为与编码Zeb2 mRNA的区域的5'端非编码区域的一个内含子上的5'端剪切位点的相对的区域。反义非编码RNA的表达可以阻止mRNA前体上一个内含子的切除，从而使得相应的mRNA无法与核糖体结合，Zeb2基因因而也就无法表达。长链反义非编码RNA的编码区域通常与相关蛋白质的编码区域一致但更深入的研究表明，mRNA和反义非编码RNA各自的表达模式相当复杂。
