首页 >
组氨酸标签
✍ dations ◷ 2025-08-17 02:38:22 #组氨酸标签
组氨酸标签(英语:Polyhistidine-tag,或 hexa histidine-tag, 6xHis-tag, His6 tag)是由连续六个以上的组氨酸所组合而成的一段氨基酸序列。最初为Roche公司发明,带有组氨酸标签的质粒则为Qiagen所有,由于原始的专利保护已经过期,故不论学术或商业皆可免费使用。一般而言,科学家借由基因工程将此标签放置于重组蛋白质的N端、C端或两端。以大肠杆菌或其他原核生物表现的重组蛋白会累积在细胞质中,为了取得重组蛋白,以物理性的方式如高压,或生物性的方式如溶菌酶,或两种方式合并使用去破坏细胞膜,使得重组蛋白悬浮于缓冲溶液中。此时要将重组蛋白从许许多多细菌的蛋白质中分离出来并不容易,但若重组蛋白带有组氨酸标签,则利用亲和性层析即可有效的进行纯化。市面上常见的组氨酸标签亲和性层析法,是利用琼脂糖(Agarose)为胶体的基底(resin beads),在琼脂糖上修饰螯合剂亚氨基二乙酸(iminodiacetic acid, IDA)或氨三乙酸(nitrilotriacetic acid, NTA),此时胶体即可螯合二价或三价的金属离子,例如镍离子、钴离子、铜离子及铁离子。组氨酸标签亲和性层析胶体最常搭配的二价离子为镍离子,螯合上镍离子的胶体称为Ni-chelate, Ni-IDA 或 Ni-NTA 胶体。由于组氨酸上的咪唑官能基带有局部负电荷,故组氨酸标签能与被胶体螯合住的金属离子产生异性电荷相吸力,因此带有组氨酸标签的蛋白质即可被胶体吸附,其余宿主的蛋白质因无法吸附所以被流洗掉,接着用含有150-300mM的咪唑(Imidazole)溶液将重组蛋白洗出,达到纯化的效果。组氨酸标签可以作为抗原,故可利用抗体侦测带有组氨酸标签的重组蛋白。广泛用于酵素结合免疫吸附分析法(ELISA)及西方墨点法(western blotting)等免疫分析方法。亦可利用含有金属离子的萤光染剂,将聚丙烯酰胺凝胶胶体染色。带有组氨酸标签的蛋白质,可固着(immobilization)于有镍离子或钴离子涂层之微量滴定板(microtiter plate)或是蛋白质芯片上。
相关
- 帕罗西汀帕罗西汀(Paroxetine)是一种选择性5-羟色胺再吸收抑制剂(SSRI)型的抗抑郁药,其药物形态为盐酸帕罗西汀(Paroxetine hydrochloride),商品名为“赛乐特”(Seroxat)。在临床上常用于社交
- 巴西卢佐岛巴西卢佐岛(Basiluzzo)是意大利西西里岛北侧的火山岛岛链伊奥利亚群岛中面积最小的一个岛,面积只有1 km²。位置介于帕纳雷阿岛和斯特龙博利岛之间。其古代名称为"Hycesia"。坐
- 利百加根据《圣经·创世纪》记载,利百加(希伯来语:רִבְקָה,Rivqa)是以撒(Issac)的妻子,非孪生兄弟以扫和雅各的母亲。她是亚伯拉罕兄弟拿鹤的孙女,彼土利的女儿,亚伯拉罕是以撒的父亲
- APP1AAP, 1AMB, 1AMC, 1AML, 1BA4, 1BA6, 1BJB, 1BJC, 1BRC, 1CA0, 1HZ3, 1IYT, 1MWP, 1OWT, 1QCM, 1QWP, 1QXC, 1QYT, 1TAW, 1TKN, 1UO7, 1UO8, 1UOA, 1UOI, 1X11, 1Z0Q, 1ZE7
- 性成熟障碍性成熟障碍(英语:Sexual maturation disorder)是一种焦虑症或抑郁症,与一个人的性别认同或性取向的不确定性有关。世界卫生组织在“与性发育和性取向相关的心理和行为障碍(英语:Ps
- 塞浦路斯塞浦路斯图书馆 (Κυπριακή Βιβλιοθήκη) ,为塞浦路斯的国家图书馆。1927年,当时的英国殖民总督Ronald Storrs创建了塞浦路斯公共图书馆。1968年,依照塞浦路斯
- 核型核型(英语:Karyotype)是一种生物或细胞的染色体组成。用于核型分析。当细胞处于有丝分裂中期时,染色体排列在细胞赤道板,是观察它们的最好时机。对这些细胞染色,通过显微镜拍照获
- 超对称超对称(supersymmetry,简称SUSY)是费米子和玻色子之间的一种对称性,该对称性至今在自然界中尚未被观测到。物理学家认为这种对称性是自发破缺的。大型强子对撞机将会验证粒子是
- 拉沃斯拉夫·鲁日奇卡拉沃斯拉夫·斯捷潘·鲁日奇卡(克罗地亚语:Lavoslav Stjepan Ružička,1887年9月13日克罗地亚武科瓦尔 - 1976年9月26日瑞士),克罗地亚化学家,1939年获诺贝尔化学奖。鲁日奇卡生
- 勒内·列奥米尔勒内-安托万·费尔绍·德·列奥米尔(René-Antoine Ferchault de Réaumur,,1683年2月28日-1757年10月17日),又译雷奥米尔,法国科学家,在许多不同的领域都有成就,尤其是昆虫的研究。