锌指核酸酶

✍ dations ◷ 2025-04-03 11:36:50 #锌指核酸酶
锌指核酸酶(英语:Zinc-finger nucleases, ZFNs),是人工改造的限制酶,通过融合锌指结构的结合DNA结构域和分解DNA结构域而成。可通过基因工程改造锌指结构域使锌指核酸酶针对复杂基因组里的特定DNA顺序。借助内源DNA的修复机制,锌指核酸酶可以精确改变高等动物的基因组。类似的技术还有类转录活化因子核酸酶。锌指核酸酶是一种特定于位点的核酸限制内切酶功能:设计在特定的位置来结合并分解DNA,含有两个蛋白质结构域。第一个结构域是DNA结合结构域,其由真核转录因子并包含锌指所构成;第二个结构域是核酸酶结构域,它由FokI限制酶构成,并负责DNA的催化分解。type IIs 核酸内切酶 FokI 的非特异分解域经常被用做 ZFNs 的分解域, 这个分解域需要二聚化来分解DNA。 因此一对ZFNs只能用于定位非回文的DNA位点。标准的ZFNs每个域的碳端都融合了分离域。为了让两个分离域二聚化并分解DNA,两个单独的ZFNs需要结合在不同的DNA链上并且他们的碳端相隔一定的距离。在锌指域和分解域之间最常用的链接序列要求每个结合位点的5'端分隔5到7个bp。几个不同的蛋白质工程技术已经用来提高用于ZFNs核酸酶域的活性和特异性。直接进化被用来产生FokI的多样性以增强被作者称为"Sharkey"的 分解活性。通过修改二聚化的接口以便只有目的异二聚体类型有活性,基于结构的设计也被用来提高FokI的分解特异性。

相关

  • 双球菌双球菌(拉丁语:diplococcus,复数diplococci)是球菌的一类,其细胞沿一平面分裂,而子细胞成双排列。代表种类有脑膜炎双球菌(Neisseria meningitidis)、淋球菌(Neisseria gonorrhoeae)等
  • 无脊椎动物无脊椎动物(Invertebrate)是背侧没有脊柱的动物,包括棘皮动物、软体动物、刺胞动物、节肢动物、海绵动物、线形动物以及脊索动物门的头索动物及尾索动物等。其种类数占动物总种
  • 语言习得语言习得(英语: language acquisition,又译“语言悉得”〔因为此概念与学习无关〕)是人类语言发展的进程,也是典型的人类特有的特征之一,因为非人类的生物不使用语言交流。第一
  • 十字架十字架曾作为一种古代死刑的刑具。《新约圣经》希腊文版圣经记载耶稣曾被犹太教宗教领袖拘送到罗马帝国驻犹太总督彼拉多,之后被判处此刑。所以基督十字也是基督教重要的象征
  • 利古里亚海坐标:43°29′54″N 9°02′30″E / 43.49833°N 9.04167°E / 43.49833; 9.04167利古里亚海(法语:Mer Ligure;意大利语:Mar Ligure)是地中海的一部分,位于意属里维耶拉(意大利利古
  • 麦克米伦出版公司麦克米伦出版公司(Macmillan Publishers Ltd.)是六大出版商之一,由苏格兰人丹尼尔及亚历山大·麦美伦两兄弟于1843年在英国伦敦成立,前英国首相哈罗德·麦美伦于卸任首相后曾担
  • 罗伯特·温伯格罗伯特·阿伦·温伯格(英语:Robert Allan Weinberg,1942年11月11日-),美国癌症学家。1969年,取得麻省理工学院博士学位。他是麻省理工学院的丹尼尔·K·路德维希癌症研究教授(Daniel
  • 罗纳托·杜尔贝科罗纳托·杜尔贝科(意大利语:Renato Dulbecco,1914年2月22日-2012年2月19日),意大利出生的病毒学家,二次世界大战后与好友神经生物学家丽塔·列维-蒙塔尔奇尼一起移居美国。由于发现
  • 韭葱韭葱(别名扁葱或京葱)为葱科葱属的栽培作物。在历史上,韭葱曾被赋予多种生物学学名,但目前通常认为其是象大蒜的栽培品种。它是威尔士的代表植物。多年生宿根草本,一般作二年生栽
  • 逆转录聚合酶链反应逆转录PCR,或者称逆转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板透过PCR