real-time RT-PCR

✍ dations ◷ 2024-12-22 17:59:33 #real-time RT-PCR

即时聚合酶链式反应（英语：Real-time polymerase chain reaction）是一种在DNA扩增反应中，以萤光染剂侦测每次聚合酶链锁反应（PCR）循环后产物总量的方法。此实验法已被众多科学家采用，因为其侦测范围广、灵敏度高、准确、专一及快速。PCR的发展因为侦测感染病患的病毒（不过RNA病毒须先逆转录成DNA才进行PCR）或细菌量、癌症监测、诊断个别基因差异的用药反应等应用而大幅提高。PCR的方法是基于侦测目标物在反应前及PCR后产物的量化关系，越早探测到指定萤光值表示目标基因组越多。相对于终端PCR方式（end-point PCR，传统的PCR配合凝胶电泳，在反应后侦测）qPCR有许多优点。其结果可以较快取得且稳定，因为是采用非常敏感的化学萤光，而且不需要再继续处理PCR反应后的侦测，花费时间与精神的工作步骤便可以省下。此外，因为反应后不需打开管子而减少了操作污染。qPCR分析亦适于更具挑战性的应用，如多重侦测与高通量分析。使用于PCR侦测的化学物基本可分为两类：非专一性化学物通常是与DNA结合的萤光染剂；目标专一性化学物是使用萤光探针或引子。基因表达分析、检验生物芯片的结果、siRNA与miRNA、诊断、基因型鉴定

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