real-time RT-PCR

✍ dations ◷ 2025-06-27 16:01:10 #real-time RT-PCR
即时聚合酶链式反应(英语:Real-time polymerase chain reaction)是一种在DNA扩增反应中,以萤光染剂侦测每次聚合酶链锁反应(PCR)循环后产物总量的方法。此实验法已被众多科学家采用,因为其侦测范围广、灵敏度高、准确、专一及快速。PCR的发展因为侦测感染病患的病毒(不过RNA病毒须先逆转录成DNA才进行PCR)或细菌量、癌症监测、诊断个别基因差异的用药反应等应用而大幅提高。PCR的方法是基于侦测目标物在反应前及PCR后产物的量化关系,越早探测到指定萤光值表示目标基因组越多。相对于终端PCR方式(end-point PCR,传统的PCR配合凝胶电泳,在反应后侦测)qPCR有许多优点。其结果可以较快取得且稳定,因为是采用非常敏感的化学萤光,而且不需要再继续处理PCR反应后的侦测,花费时间与精神的工作步骤便可以省下。此外,因为反应后不需打开管子而减少了操作污染。qPCR分析亦适于更具挑战性的应用,如多重侦测与高通量分析。使用于PCR侦测的化学物基本可分为两类:非专一性化学物通常是与DNA结合的萤光染剂;目标专一性化学物是使用萤光探针或引子。基因表达分析、检验生物芯片的结果、siRNA与miRNA、诊断、基因型鉴定

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