酵素结合免疫吸附分析法

✍ dations ◷ 2024-12-22 20:17:07 #酵素结合免疫吸附分析法

酶联免疫吸附试验（又称酵素免疫分析法，Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)，简称酶联法）利用抗原抗体之间专一性键结之特性，对检体进行检测；由于结合于固体承载物(一般为塑胶孔盘)上的抗原或抗体仍可具有免疫活性，因此设计其键结机制后，配合酵素呈色反应，即可显示特定抗原或抗体是否存在，并可利用呈色的深浅进行定量分析。酶联法的一项重要应用为用于HIV检测，其检测的蛋白一般为HIV的p24蛋白 (P24 capsid protein（英语：P24 capsid protein）)。根据待测样品与键结机制的不同，ELISA可设计出各种不同类型的检测方式，主要以三明治法（sandwich）、间接法（indirect）、以及竞争法（competitive）三种为主。三明治法常用于检测大分子抗原，一般之操作步骤为:三明治法分别以两种抗体对检体中的抗原进行两次专一性辨认，因此专一性相当高，但此待测抗原必须是多价抗原，如此才可获得两种以上的专一性抗体，以分别进行夹心；而且此法需要足够的表位空间以进行抗原抗体的夹心，所以并不适用于半抗原或小分子抗原等分子量较小之标的。间接法常用于检测抗体，一般之操作步骤为：竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，其操作步骤为：当需要侦测无法获得两种以上单一性抗体的抗原，或是不易得到足够的纯化抗体以固着于孔盘上时，一般会考虑使用竞争法ELISA。

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