首页 >
Taq聚合酶
✍ dations ◷ 2025-10-07 00:04:41 #Taq聚合酶
结构 / ECOD结构 / ECODTaq聚合酶是由钱嘉韵于1976年从嗜热细菌海栖热袍菌(Thermus aquaticus)中分离出的DNA聚合酶。Taq聚合酶的常用简称有Taq Pol(或Taq酶)。Taq酶常用于放大短DNA片段的聚合酶链式反应中(PCR)。海栖热袍菌生活在温泉与深海热泉中,从其中分离的Taq酶可承受PCR中所需要的高温。因此Taq酶取代了原先用于PCR中的大肠杆菌DNA聚合酶。Taq酶的最适活性温度为75–80°C,在92.5°C时半衰期高于2小时,95°C时为40分钟,97.5°C时为9分钟;Taq酶可在72°C时于10秒内复制一含有1000个碱基对的DNA。Taq酶的缺点之一是缺乏从3'端到5'端的外切酶校正活性,从而导致Taq在复制时保真度不高。原先测得的错误率为每9000个核苷酸中出现1次错误。为了降低出错的几率,科学家陆陆续续发现了其他可以取代Taq聚合酶的聚合酶。举例来说,Pfu是具有3'至5'端外切酵素特性的聚合酶,出错几率约为1/2.6x1000000。但相较于Taq聚合酶,Pfu合成DNA的速度较慢,因此也有混合使用的配方被制作出来。近期的电脑模拟技术以及新兴生物技术,也能透过人工修改Taq酶的结构来增强性能,购买这些商业化的酶可以降低实验的错误率。Taq聚合酶有一个特性除了合成速度快、出错率高以外,还会使合成的产物“末端带有一个A碱基”,TA克隆即是利用Taq聚合酶此特性,Taq的PCR产物在3'末端会多出一个A,此时只须有一个与其互补的T表现在质体上,即能彼此靠近,借由接合酶连接起来。透过此方式,可省去限制酶剪切的时间,直接利用PCR产物与质体彼此有互补两端的特性,可快速黏合起来。二十世纪八十年代初凯利·穆利斯在鲸鱼座集团(英语:Cetus Corporation)研究DNA合成在生物科技上的应用。穆利斯熟悉DNA寡核苷酸作为目标DNA探针、作为DNA测序引物、作为cDNA合成引物的技术。穆利斯在1983年开始尝试将两个引物与目标DNA片段杂交后加入DNA聚合酶,此方法可以实现指数级别的DNA复制,放大了两前体中间的DNA片段。但在每轮复制后需要将混合物加热到90°C以上使新合成的DNA熔解;两条DNA链分开后方可成为下一轮复制的模板。在发现Taq酶之前,加热过程也会使当时使用的大肠杆菌DNA聚合酶I失活。Taq酶的应用使PCR可在高温下进行(~60°C),有助于提高引物专一性、减少非特异性产物。PCR只需在封闭试管中配合相对简单的热循环仪(英语:thermal cycler)上进行。因此Taq酶是解决分子生物学中众多有关DNA分析的问题的基石。
相关
- 咯血咳血又称为咯血,是一种症状,指肺或气管中的出血,经由咳嗽而吐出。多半是因为所吐出的痰中带有血丝而被发现。最常见的原因就是支气管炎、肺炎、肺肿瘤、肺结核等疾病。或是使用
- 多发性硬化症多发性硬化症(Multiple sclerosis,MS)是一种脱髓鞘性神经病变(英语:demyelinating disease),患者脑或脊髓中的神经细胞表面的绝缘物质(即髓鞘)受到破坏,神经系统的信号转导受损,导致一
- 需氧菌好氧生物(英语:Aerobic organism,或 aerobe),又译为好气生物、耗氧生物、需氧生物,是能在有氧的环境中生存及生长的生物。好氧生物利用氧的化学反应来分解糖及脂肪,以获得能量。几
- 透镜本条目介绍的是光学设备,其他领域的透镜不在此处讨论。透镜是一种将光线聚合或分散的设备,通常是由一片玻璃构成,但用于其他电磁辐射的类似设备通常也称为透镜,例如:由石蜡制成的
- 宿主宿主(英语:Host),也称为寄主,是指为寄生物包括寄生虫、病毒等提供生存环境的生物。最终宿主(primary host或definitive host)是指寄生物的成虫赖以寄生的物种。这类宿主通常为寄生
- 基因组基因组(genome)在生物学中,是指一个生物体所包含的DNA(部分病毒是RNA)里的全部遗传信息,又称基因体。基因组包括基因和非编码DNA。1920年,德国汉堡大学植物学教授汉斯·温克勒(Hans
- RNA干扰RNA干扰(RNA interference,缩写为RNAi)是指一种分子生物学上由双链RNA诱发的基因沉默现象,其机制是通过阻碍特定基因的转录或翻译来抑制基因表达。当细胞中导入与内源性mRNA编码
- 蛋白酶抑制剂蛋白酶抑制剂(英语:Protease inhibitor)是带有环状结构的肽化合物,可竞争性或非竞争性抑制蛋白酶活性,此外,蛋白酶抑制剂还可以降低白介素-1β转换酶的表达,从而使病毒颗粒无法成熟,
- 肺栓塞肺栓塞(英语:Pulmonary embolism,简称 PE),系描述肺动脉遭到来自其他地方的物质,经过血液循环而阻塞肺动脉的病况。肺栓塞的症状有呼吸困难、吸气时胸痛,以及咳血等等,也可能会出现
- 选择性雌激素受体调节剂选择性雌激素受体调节物(Selective estrogen receptor modulators,简称SERMs) 为作用于动情素受体(英语:Estrogen receptor)的药物。此类药物可以分为动情素受体激动剂以及受体拮