布拉德福蛋白质定量法

✍ dations ◷ 2025-06-08 05:46:03 #蛋白质方法,分析化学,化学鉴定

布拉德福蛋白质定量法(Bradford protein assay)(中文名称为“考马斯亮兰法”)为一种利用光谱学技术分析溶液中蛋白质浓度的技术。本定量法会受待测氨基酸序列影响,此方法为Marion M. Bradford(英语:Marion M. Bradford)医生所开发。

布拉德福蛋白质定量法为一种利用比色法测定蛋白质浓度的化验法。考马斯亮蓝G-250在酸性环境下,会从红色型态转为蓝色型态,并与蛋白质紧密结合。在形成这个复合物的过程中会经历两种反应:红色态的考马斯亮蓝会先将其自由电子丢给蛋白质的可电离区,造成蛋白质构型改变,并暴露其疏水性区段。于是蛋白质的三级结构会以凡得瓦力与染剂结合。此外,染剂中的负电区会与蛋白质中的正电区相互结合,与蛋白质结合的考马斯亮蓝会因此稳定其蓝色构型,造成溶液颜色改变,此时即可利用光谱仪来测量此变化。

与蛋白结合之后的染料,在一段时间(2 分钟到 1 小时)之内,其吸收光谱图在 595 nm 处有一个最大吸收峰。 染料在与蛋白结合前,以阳离子形态存在,显红色或者绿色;与蛋白结合之后,染料分子的阴离子形态被稳定,显蓝色。染料的吸收光谱在 595 nm 处的吸收峰的增加,正比于结合了蛋白质的染料分子数目,故也正比于样品中蛋白质的数目(浓度)。

布拉德福蛋白质定量法与其它测量蛋白的方法不同,不容易受到蛋白质中其它化学成分的影响。

此蛋白质分析法会受几种洗涤剂和中性盐的干扰,如SDS,Triton。 结果也取决于所分析蛋白质中氨基酸的种类。

其他替代蛋白质化验法还有:

相关

  • 产后抑郁症产后抑郁症(英语:postpartum depression,PPD)也叫产后忧郁症,是妇女在分娩孩子之后由于生理和心理因素造成的抑郁症,症状有紧张、疑虑、内疚、恐惧等,极少数严重的会有绝望、离家
  • 蛋化石蛋化石(Egg fossils)是指由远古动物产下的卵化石化之后的残留物。作为动物的生理化过程的见证,蛋化石被认为是遗迹化石的一个类型。在极少数情况下,蛋化石内可能还保存有曾经在
  • 雅克·莫诺雅克·吕西安·莫诺(Jacques Lucien Monod,1910年2月9日-1976年5月31日)是一位法国生物学家,出生于巴黎,他与弗朗索瓦·雅各布共同发现了蛋白质在转录作用中所扮演的调节角色,也就
  • 纳米线纳米线是一种纳米尺度(10−9 米)的线。 换一种说法,纳米线可以被定义为一种具有在横向上被限制在100纳米以下(纵向没有限制)的一维结构。这种尺度上,量子力学效应很重要,因此也
  • 加拿大绿党加拿大绿党(英语:Green Party of Canada;法语:Parti vert du Canada)是加拿大的联邦政党之一,于1983年创立。截至2006年8月27日,该党拥有超过10,000名党员,以党员数计为加拿大最大的
  • ɠ̊清软颚内爆音(voiceless velar implosive)是一种罕见的辅音,出现于一些口语中。国际音标将此音记作⟨ɠ̊⟩或⟨kʼ↓⟩;另一个可直接表示此音的音标⟨ƙ⟩则已在1993年被撤回。
  • 斑脸海番鸭斑脸海番鸭(学名:Melanitta fusca)为鸭科海番鸭属的鸟类,俗名海番鸭、奇嘴鸭。分布于东西伯利亚北部、欧洲、北美洲西伯利亚东部沿海、朝鲜、日本、欧洲、北美洲东西海岸、中国
  • 暖鼠属暖鼠属(Thalpomys),哺乳纲、啮齿目、仓鼠科的一属,而与暖鼠属(暖鼠)同科的动物尚有南美岭鼠属(金岭鼠)、美洲攀鼠属(稽攀鼠)、稻水鼠属(哈氏稻水鼠)、棉鼠属(棕棉鼠)等之数种哺乳动物。Tha
  • 第29届金马奖第29届金马奖,由中华民国官方举办的华语电影评选活动,为1992年台湾与华语电影业界的年度盛事之一,于台北市国父纪念馆举行颁奖典礼。本届由《无言的山丘》获得最佳剧情片奖。颁
  • 桃园美国学校桃园美国学校(英语:Taoyuan American School)是桃园市第一所采用美国教育课程为主的外侨学校,位于桃园市芦竹区,地处中山高速公路与桃园国际机场联络道路的交会口。校址位于开南