布拉德福蛋白质定量法

✍ dations ◷ 2025-08-13 00:15:43 #蛋白质方法,分析化学,化学鉴定

布拉德福蛋白质定量法(Bradford protein assay)(中文名称为“考马斯亮兰法”)为一种利用光谱学技术分析溶液中蛋白质浓度的技术。本定量法会受待测氨基酸序列影响,此方法为Marion M. Bradford(英语:Marion M. Bradford)医生所开发。

布拉德福蛋白质定量法为一种利用比色法测定蛋白质浓度的化验法。考马斯亮蓝G-250在酸性环境下,会从红色型态转为蓝色型态,并与蛋白质紧密结合。在形成这个复合物的过程中会经历两种反应:红色态的考马斯亮蓝会先将其自由电子丢给蛋白质的可电离区,造成蛋白质构型改变,并暴露其疏水性区段。于是蛋白质的三级结构会以凡得瓦力与染剂结合。此外,染剂中的负电区会与蛋白质中的正电区相互结合,与蛋白质结合的考马斯亮蓝会因此稳定其蓝色构型,造成溶液颜色改变,此时即可利用光谱仪来测量此变化。

与蛋白结合之后的染料,在一段时间(2 分钟到 1 小时)之内,其吸收光谱图在 595 nm 处有一个最大吸收峰。 染料在与蛋白结合前,以阳离子形态存在,显红色或者绿色;与蛋白结合之后,染料分子的阴离子形态被稳定,显蓝色。染料的吸收光谱在 595 nm 处的吸收峰的增加,正比于结合了蛋白质的染料分子数目,故也正比于样品中蛋白质的数目(浓度)。

布拉德福蛋白质定量法与其它测量蛋白的方法不同,不容易受到蛋白质中其它化学成分的影响。

此蛋白质分析法会受几种洗涤剂和中性盐的干扰,如SDS,Triton。 结果也取决于所分析蛋白质中氨基酸的种类。

其他替代蛋白质化验法还有:

相关

  • 黄帝内经《黄帝内经》为现存最早的传统中华医学著作,对于后世中医学的理论与实务有深远影响。此书相传是黄帝与岐伯、雷公、伯高、俞跗、少师、鬼臾区、少俞等多位大臣讨论医学的记述
  • 萨巴萨巴(英语:Saba),为加勒比海一岛屿,原属荷属安的列斯,现为荷兰的一个特别市(正式名称是“公共实体”),与同为荷兰特别市的博奈尔和圣尤斯特歇斯合称为“BES群岛”。岛屿面积13平方公
  • 倪齐民倪齐民(英语:Jimmy Ni,1964年12月24日-),台湾男演员。民国96年8月25日凌晨开车行经台北市新生南路与罗斯福路口时,因未注意并行距离变换车道,涉嫌擦撞1名机车骑士,且在骑士倒地后开车
  • 人机界面脑机接口(英语:brain-computer interface,简称BCI;有时也称作direct neural interface或者brain-machine interface),是在人或动物脑(或者脑细胞的培养物)与外部设备间创建的直接连
  • 牛丼牛丼(「丼」,拼音:dǎn,注音:ㄉㄢˇ)(又稱為日式牛肉饭)是一种日式速食食品,是一种丼物。主要做法是在碗内盛上米饭后,上铺一层碎牛肉片和洋葱丝,并一起蒸熟后食用,食用时可配以腌制的
  • 暴露癖露体癖(英语:exhibitionism)或阴部显露欲是指偏好在公共或半公共场合对不知情者曝露身体中通常不会暴露的部分的行为,例如暴露乳房、臀部或阴茎。这种行为的动机可能是自身欲望
  • 协和医院住宅群协和医院住宅群,位于北京市东城区外交部街59号、北极阁三条26号,是协和医院的住宅区,北京市文物保护单位。该住宅区位于外交部街北侧,西临东单北大街,坐北朝南,约建于1920年左右,是
  • 罗得岛州县级行政区列表美国罗得岛州共有5个县。罗得岛州与夏威夷州并列为美国县级行政区数量第二少的州份,仅次于特拉华州(3县)。尽管罗得岛州有设置县级行政区,不过并没有县政府(英语:Local government
  • 美国空军特种作战司令部空军特种作战司令部(Air Force Special Operations Command,AFSOC)是美国空军的特种作战部分,为美国空军十大一级司令部之一,战时受美国特种作战司令部指挥。空军特种作战司令部
  • 祝融祝融(?-?),中国上古神话人物,号赤帝,后人尊为火神,广东一带亦有尊为南海神,俗称洪圣爷。有人说祝融是古时三皇五帝的三皇之一。亦为夏神,是神农氏的辅佐神。据《山海经》记载,祝融的居所