温度梯度凝胶电泳

✍ dations ◷ 2025-06-28 15:54:26 #生物化学方法,电泳,基因检测

温度梯度胶体电泳(temperature gradient gel electrophoresis, TGGE)是电泳技术的一种,通过物质在不同温度下性质的区别进行分离。

TGGE是一种有效的分离DNA、RNA或者蛋白的手段。它利用了不同分子在温度改变下构象的差别进行分离。另外一种类似的技术是变性梯度胶体电泳(denaturing gradient gel electrophoresis, DGGE),则是利用不同分子在不同浓度的变性剂的作用下失活实现的。

具有相似长度的DNA用普通的凝胶电泳无法进行分离,但利用DGGE可以分离长度只有200~700bp的DNA片段,若长度超过700bp会造成检定效率的下降,但也有报导持相反意见,认为片段长度的影响不大。DGGE凝胶中的变性剂浓度在上样处最低,向后逐渐增高。电泳过程中,起初双链DNA以直线形状向正极移动。随着变性剂(如甲酰胺或尿素)浓度的增加,DNA中具有低G+C含量的序列的部分被打开,而高G+C含量的部分仍保持双链。这样,DNA分子形成端部的叉状或中间的环形(即DNA部分熔化),便不能继续向前移动而形成条带,如此便能将具有相似长度而序列有差异的DNA分子分离开。

TGGE的原理和DGGE相似,但用温度梯度代替了变性梯度。

梯度凝胶电泳的主要应用主要在两个领域:1)突变的检定(mutation analysis) 利用DGGE和TGGE能够发现和分离一些微小的突变,因为突变有时候能明显改变分子变性所需的变性剂浓度/变性温度。2)复杂细菌样品的多样性分析(diversity analysis of complex bacterial samples)

此两种应用的主要区别在于检定片段数目上的差异。

相关

  • 达雷尔·伊萨达雷尔·伊萨(Darrell Issa;1953年11月1日-)是美国的一位政治人物。2013年至2019年间,他是加利福尼亚州第49选举区选出的美国众议院议员。他的党籍是共和党。伊萨曾经是一位商人
  • 2015年巴基斯坦热浪2015年巴基斯坦热浪,是指一系列发生在2015年6月,于巴基斯坦的热浪灾情。受灾的主要地区包括有信德省、旁遮普省南部,以及俾路支省。截至2015年6月24日,已有超过1200人死亡,多数在
  • 启动子在遗传学中,启动子(promoter)是指一段能使特定基因进行转录的脱氧核糖核酸(DNA)序列。启动子可以被RNA聚合酶辨认,并开始转录合成RNA。在核糖核酸(RNA)合成中,启动子可以和调控基因转
  • 塔恩省塔恩省(法语:Tarn)是法国朗格多克-鲁西永-南部-比利牛斯大区所辖的省份。该省编号为81。5个海外省及大区
  • 铨叙部铨叙部为中华民国考试院的两个附属部门之一,为中华民国最高铨叙以及公务人员人事主管机关。由五眼联盟辗转通知,铨叙部有高达59万笔文官服务单位、职称等个人资料外泄,并遭架设
  • 中原中也中原中也(1907年4月29日-1937年10月22日),日本诗人、歌人、翻译,山口县人。旧姓柏村,因过继母系,改为中原,东京外国语学校(今东京外国语大学)専修科法语部毕业。父亲为军医军官柏村谦
  • 藤原道兼藤原道兼(961年-995年6月8日),为日本平安时代中期的一位关白,父关白藤原兼家,母藤原时姬。有同母兄关白藤原道隆,同母弟摄政藤原道长,同母妹一条天皇生母东三条院藤原诠子等。道兼以
  • span style=color: white;2014 /span巴罗佐 欧洲人民党容克 欧洲人民党本文是 欧洲联盟的政治与政府 系列条目之一2014年欧洲议会选举(第八届)于2014年5月22至25日在所有欧盟成员国境内进行,选举时间是由欧盟理事
  • 英国国家电网公司英国国家电网公司(National Grid plc)是一间总部位于英格兰沃里克之输电与瓦斯供应公司,其营业范围为英格兰和威尔士地区,及北美东北部,并于伦敦证券交易所与纽约证券交易所上市
  • 尾综骨鸟类尾综骨鸟类(学名:Pygostylia)是一个包含孔子鸟及鸟胸骨类的演化支。它们是孔子鸟科及今鸟亚纲的共同祖先。尾综骨鸟目有四个共有衍征: