王以旗（1486年－1553年），字士招，号石冈，直隶应天府江宁县（今江苏省南京市）人，明朝政治人物，正德辛未进士，嘉靖间官至工部、兵部尚书。
应天府乡试第八十四名举人。正德六年（1511年）中式辛未科进士。授江西上高县知县。选监察御史，巡按河南等地。
明世宗即位，欲加兴献帝皇号，王以旗抗言不可。累升至兵部右侍郎，兼右佥都御史总理河漕。拜为南京右都御史，召为工部尚书、后改左都御史，代替陈经为兵部尚书兼督团营。三边总督曾铣曾经上疏收复河套平原，王以旗支持，但世宗忽然改变看法，严厉呵斥曾铣。王以旗等人非常恐惧，于是忽然反驳此前观点。世宗逮捕曾铣，而命王以旗代任。在任期间，其多有战功，屡次获荫。六年后，修筑延绥城堡四千五百余所，加太子太保衔。嘉靖三十二年（1533年）卒，军民为罢市纪念。赠少保，谥襄敏。
有《漕河奏议》、《王襄敏公集》。
