周顺昌（1584年－1626年），字景文，号蓼洲，谥忠介。南直隶吴县（今江苏苏州）人。东林七贤之一，被宦官魏忠贤所害，引爆了苏州抗议事件，最后被酷刑虐死于狱中。善画墨兰，著有《烬余集》。
万历四十一年（1613年）癸丑科进士，授福州府推官，升吏部文选司员外郎。正直清廉，疾恶如仇。
天启五年（1625年）魏大中被宦官魏忠贤陷害逮捕，路过苏州吴门时，顺昌亲诣其船，要将女儿许配给大中之孙。抻解囚犯的旗尉赶忙催促上路，顺昌破口大骂：“你不知道世间有不怕死的男子汉么？回去告诉魏忠贤，我就是以前的吏部郎周顺昌！”魏忠贤自恨之，而魏忠贤的义子倪文焕，也趁机弹劾周顺昌与魏大中家通婚，并且诬告周贪污钜款，周顺昌于是被革职，但是魏忠贤仍未息怒。
应天巡抚周起元罢官，周顺昌曾作文送他，文章有斥责魏忠贤阉党之语。天启六年魏忠贤假苏杭织造太监李实诬攀，将顺昌下锦衣卫镇抚司诏狱。逮捕时激起苏州人民反感，由于周顺昌平日有德于民，上万民众上街争夺周顺昌，两名东厂锦衣卫被当众打死，后来五位民众出面顶罪，避免苏州居民被官府法办，也被处死。复社领导人张溥《五人墓碑记》就是纪念这五人的作品。
顺昌在狱中被锦衣卫许显纯拷打，要求他交出赃款三千两银，牙齿尽落，负责拷问的显纯问道“复能骂魏上公否？”，周顺昌把满口鲜血喷到许显纯脸上，骂声更厉。许显纯只好半夜偷偷杀了顺昌，年四十三。。
崇祯元年（1628年），崇祯帝追究阉党，忠贤畏罪自杀，顺昌追赠太常寺卿，谥忠介，加封其一个儿子。
