SDS-PAGE

✍ dations ◷ 2025-08-06 06:30:36 #SDS-PAGE
十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语:sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,简称SDS-PAGE)是胶体电泳的一种,常用于生物化学、鉴识科学、遗传学和分子生物学等领域的分析技术,此项技术的原理,是利用检体中蛋白质分子量大小的不同,使其在电泳胶中分离。是最常用的蛋白质分析技术之一。将蛋白质溶液与SDS(十二烷基硫酸钠)混合,SDS为界面活性剂会破坏蛋白质的二级结构使其变性,并包覆变性蛋白质,使其带有一致的负电荷(大约每两个氨基酸一个SDS)和一致的形状(长条形)。如果没有SDS使其负电荷一致,可能会使有相近分子量的蛋白质,分布于不同的位置,此种电泳法为原态胶体电泳(Native-PAGE)。进行电泳时,分子量较小的较容易落下,相反的分子量较大的则卡在起点附近。虽然较大的电压可以缩短实验的时间,却会得到较模糊的结果,因此实验可能长达数个小时。丙烯酰胺是聚丙烯酰胺凝胶的基本成分,丙烯酰胺透过桥架分子聚合。使用直立电泳组合时,由上(负极)至下(正极)的主要组成分别为缓冲液(Tris-Glycine,pH 8.3)→样本溶液(pH 6.8)→堆积层(Tris-HCl,pH 6.8)→分离层(Tris-HCl,pH 8.8)→缓冲液(Tris-Glycine,pH 8.3)。样本在堆叠层电泳的过程中,会被压成一个薄层,再以相同的起始点,进入分离层。堆积层含有4-5%的丙烯酰胺,这样堆积层的孔径就相对较大和松散。这一层的目的是让样品在堆积层和分离层的界面浓缩到一个超薄的区域(1-100nm)。当施加电压时,由于蛋白质外包裹着SDS,便使蛋白向正极迁移,由于这层的pH是6.8,甘氨酸在这里呈两性离子状态存在,所以这一层的离子强度便很低,从而形成高电阻,最终形成 高电场力 ,从而使蛋白质的在堆集层的迁移速率高于分离层。另外由于这层的孔径大,所以对一般蛋白质的迁移速率不造成影响; 另外当蛋白质到达堆积层和分离层边界时,分离层孔径小,首先到达边界的蛋白质速率便减慢,而后来的蛋白质仍然保持高速率迁移,便使得蛋白质在边界处堆积浓缩。

相关

  • 搜索引擎优化搜索引擎优化(英语:search engine optimization,缩写为SEO),是一种透过了解搜索引擎的运作规则来调整网站,以及提高目的网站在有关搜索引擎内排名的方式。由于不少研究发现,搜索引
  • 哲学博士哲学博士(拉丁语:Philosophiæ Doctor,英语:Doctor of Philosophy,简称:PhD或Ph.D,又译研究博士),在绝大多数国家是大学可以授予的最高学位,已完成博士阶段课程但尚未完成论文的博士生
  • 美洲国家组织美洲国家组织(西班牙语:Organización de los Estados Americanos,简称:OEA;英语:Organization of American States,简称:OAS;法语:Organisation des États américains,简称:OEA;葡萄牙
  • 家电家用电器,简称家电,是指以电能来进行驱动(或以机械化动作)的家庭用具,可帮助执行家庭杂务,如炊食、食物保存或清洁。基本上,家用电器分为大型家电(白色家电、黑色家电)和小家电。大型
  • 城市美化运动城市美化运动(City Beautiful Movement)是1890年代和1900年代在北美洲达到繁荣的建筑和城市规划领域的进步主义改革运动,意图在城市进行美化,兴建宏伟的纪念碑式建筑。这一运动
  • 布鲁克林博物馆布鲁克林博物馆(英语:Brooklyn Museum)位于美国纽约布鲁克林区,是一座综合性的艺术、历史博物馆。占地560,000平方英尺(52,000平方米),本博物馆的实际容量是纽约市第三大,大约收藏一
  • 恒星光谱在天文学,恒星分类是将恒星依照光球的温度分门别类,伴随着的是光谱特性、以及随后衍生的各种性质。根据维恩定律可以用波长来测量物体表面的温度,但对距离遥远的恒星是非常困难
  • S2S2可以是指以下的条目:
  • 安娜·马格纳尼安娜·马格纳尼(Anna Magnani,1908年3月7日-1973年9月26日) 是意大利舞台和电影演员。 她凭借电影《玫瑰纹身(英语:The Rose Tattoo (film))》(The Rose Tattoo)获得奥斯卡最佳女主角
  • 关孝和关孝和(1642年-1708年12月5日),又名新助,字子豹,号自由亭,是日本江户时代的数学家。关孝和在日本数学史上有重要地位,是数学流派“关流”的开山鼻祖,被日本人称为“算圣”。他的主要