隔绝式恒温聚合酶连锁反应

✍ dations ◷ 2025-10-06 11:24:42 #聚合酶链式反应,DNA,恒温核酸复制反应

隔绝式恒温聚合酶连锁反应（insulated isothermal polymerase chain reaction, iiPCR）是一种在封闭毛细管内进行的聚合酶连锁反应（polymerase chain reaction, PCR)。此技术自2010年起，由瑞基海洋生物科技股份有限公司（GeneReach Biotechnology Corp.)进行优化并开发一系列设备（商品名POCKIT）与试剂上市贩售。它的核心技术利用毛细管底部单一热源加热产生热对流，使局部反应溶液历经95°C（底部）到60°C（顶部）连续温度变化而完成核酸扩增复制反应。Krishnan等人在2002年描述毛细管内的Rayleigh-Benard式热对流可以完成PCR。随后出现几种形式描述局部历经不同温度完成PCR反应之论文。甚至也提供完成此类PCR反应之产品开发原型的发表，以及这类产品的应用。

利用底部加热方式，使毛细管内形成热对流循环。历经底部95°C到顶部60°C的变化，完成PCR所需要之denature，anneal， extension三个反应阶段（动画说明）。

进行iiPCR之引子设计规则与即时聚合酶链式反应real-time PCR相似, 包含:

在iiPCR反应中建议使用 TaqMan 萤光探针. 探针设计规则如下:

成功的 PCR 反应依赖优质引子，其中因素包含:

设计引子除以上规则外，还需注意以下事项:

虽然iiPCR的反应模式与real-time PCR相同，但是因为热对流循环无法和传统PCR生降温循环类比，因此无法进行定量检测. 开发以iiPCR技术进行检测需要先进行多数阳性控制组及阴性控制组反应前后萤光量比较.若以反应前萤光量为B（Before）而反应后萤光量为A（After），两者比值A/B可以呈现核酸扩增反应过程中释放萤光染剂相对量. 经过多数阳性/阴性控制组之A/B比对，可以定出统计上显著差异之阈值. 对于待鉴定的检体，若其A/B值大于阈值则可判定为阳性，反之则为阴性。

因iiPCR的单纯反应温度特性适合进行例行性检查，而非需时时调整反应参数之研究工作. 因此开发产品时以使用者进行最少操作步骤及最不易出错的方式设计.

相关

造成疾病致病真菌（英语：Pathogenic Fungi）是引起人类或其他生物产生真菌病的真菌。已知大约300种真菌对人类具有致病性。虽然真菌是真核生物，但是许多致病真菌也是微生物。对人类致病的
假根假根是植物和真菌的一种结构，和根一样用做支撑或吸收等用途。在真菌里，假根是由固定真菌的匍匐枝向下长的小小分歧菌丝。假根会释放出消化酶并吸收消化后的有机物质。在陆生植
莱茵-鲁尔都会区北莱茵-威斯特法伦莱茵-鲁尔都会区（德语：Metropolregion Rhein-Ruhr）是德国最大的都市区，拥有超过1100万人口，拥有多个中心都市。莱茵鲁尔区面积7110平方公里，位于北莱茵-威斯特法
东沙环礁国家公园东沙环礁国家公园为中华民国第七座国家公园、第一座海洋国家公园，隶属中华民国内政部营建署，于2007年1月17日成立，并于该年的10月4日成立海洋国家公园管理处管理之。东沙环礁国
赛特赛特（Set，也作Seth，Setekh等），又名西德，在埃及神话中最初是力量之神，战神，风暴之神，沙漠之神以及外陆之神。他保护沙漠中的商队，但同时又发起沙暴袭击他们。他是盖布与努特的儿子，奈芙
荣安固伦公主荣安固伦公主（1855年－1874年），咸丰帝的庶长女，亦是其唯一的女儿，俗称大公主。生母为丽妃他他拉氏。咸丰五年五月初七日出生。大公主出生时，先是僧格林沁大败太平军，擒林凤祥、李开芳
布兰达·布蕾辛布兰达·安·布莱斯（英语：Brenda Anne Blethyn，闺名布兰达·安·巴特尔［Brenda Anne Bottle］，1946年2月20日－），英国女演员，领域横跨剧场、电视与电影。最著名作品为麦克·李1996年的电
寄生蝇寄生蝇即寄生蝇科（学名Tachinidae，又名寄蝇科）的昆虫。它们大型及有多样性，已知有超过8200个物种，其中超过1300种分布在北美洲。寄生蝇的外观极之多样。成虫可以像丽蝇般色彩鲜艳
钴六十钴-60（60Co）是金属元素钴的一个人造放射性同位素，其半衰期为5.27年。工业上通过中子活化59Co制得。它会透过β衰变放出能量高达315 keV的高速电子成为镍-60，并放出两束伽马射线，
多线程多线程（英语：multithreading），是指从软件或者硬件上实现多个线程并发执行的技术。具有多线程能力的计算机因有硬件支持而能够在同一时间执行多于一个线程，进而提升整体处理性能。