首页 >
定点突变
✍ dations ◷ 2025-06-07 01:14:15 #定点突变
定点突变(Site-directed mutagenesis),经由设计好的寡核苷酸,在任何一个基因片段上进行随意或设计好的突变,也就是说,这种突变是预先设定好的,所以也有人将它称为“反遗传法”。定点突变由加拿大生化学家迈克尔·史密斯发明,他与PCR发明者凯利·穆利斯在1993年共同获得诺贝尔化学奖。根据生物学,基因会发生突变,突变可以自发也可以诱发。在定点突变法之前,突变株的产生必须经由自然界或用化学等方法让基因突变,这属于随机突变。而突变株必须在生物体上有所改变,才能确定有突变发生。突变位置必须利用分生或化学方法来确定。而定点突变法可经由设计好的寡核苷酸,在任何一个基因片段上进行随意或设计好的突变,也就是说,这种突变是预先设定好的。定点突变的基本流程需要合成一个短的 DNA 引子。其包含了目标突变,并且与突变位点附近的模板 DNA 互补以与目的基因的 DNA 杂交。突变可以是一个碱基的改变(点突变),多个碱基的改变,增加或者删除。这个引物接着被一个 DNA 聚合酶延展,拷贝剩下的基因。拷贝后的基因包含了突变位点,并以载体的形式引入宿主细胞,并被复制。最后,突变将通过 DNA 测序以确保包含了目标突变。原始的单引物延展法很低效,突变产量低。产物包含了原有的非突变模板以及突变链,突变及非突变后代混合在一起。此外,模板 DNA 经过甲基化,而突变链未经甲基化,由于偏爱甲基化模板 DNA 的错配修复系统的存在,导致突变数目进一步下降。因此,人们开发了许多新方法来提高突变效率。1.以有配对错误的单股DNA分子作为引物,此引物包含想要突变的核苷酸,与载体进行退火后,转化导入细胞内。
2.DNA双股使用DNA 聚合酶来延长,宿主会产生两种质体,进行克隆转译后即得到突变一个氨基酸的蛋白质。利用分子选殖的方法,可以改变基因上的特定碱基,送入载体之后,可在宿主中表现。亦可知道特定氨基酸的改变对蛋白质和酵素的影响。
相关
- 微量营养素微量营养素(英语:Micronutrients),亦称为微营养素,是指一类生物体需求相对较少,但对生物机体维持正常生理学功能有重要作用的营养物质,对人来说主要包含维生素和微量矿物质两大类,其
- 环境自然环境指地球或一些区域上一切生命和非生命的事物以自然的状态呈现。这是一个环境涵盖了所有生物之间的相互作用。 自然环境可分为几个主要组成部分:自然环境是对比建成环
- 辐射电离辐射(英语:ionizing radiation)是指波长短、频率高、能量高的射线(粒子或波的双重形式)。辐射可分为电离辐射和非电离辐射,电离辐射可以从原子或分子里面电离过程(Ionization)中
- 吉尔伯特·赖尔吉尔伯特·赖尔(英语:Gilbert Ryle,1900年8月19日-1976年10月6日)是一名英国哲学家,是英国日常语言哲学中牛津学派的代表人物。他的著作《心的概念》被认为是日常语言学派的重要著
- 基础设施基建设施(英语:Infrastructure),亦称公共设施或公共建设,是指为社会生产和居民生活提供公共服务的物质工程设施,它是社会赖以生存发展的一般物质条件。基础设施不仅包括电网、通讯
- 肝功能衰竭肝衰竭(Liver failure或Hepatic insufficiency)是一种肝脏未能正常执行其蛋白合成以及代谢功能的情况。肝衰竭分成急性与慢性两种。 近来也渐渐的发现有第三种型式慢性肝衰竭
- 平行演化平行演化是指两个或多个相关但不同种系的生物,因生活在相似环境而发育了相似的形状。
- 16S 核糖体RNA16S核糖体RNA(16S ribosomal RNA),简称16S rRNA,是原核生物的核糖体中30S亚基的组成部分。16S rRNA的长度约为1,542 nt。卡尔·乌斯和乔治·福克斯是率先在系统发育中使用的16S
- 罗伯特·奥本海默朱利叶斯·罗伯特·奥本海默(英语:Julius Robert Oppenheimer,/ˈɒpənˌhaɪmər/,1904年4月22日-1967年2月18日),美国理论物理学家,曾于加利福尼亚大学伯克利分校任教物理。第二
- 东俄勒冈州立大学东俄勒冈大学是美国俄勒冈州的一所公立大学,1929年设立。学生约4千人。旧名东俄勒冈州立大学。