定点突变

✍ dations ◷ 2024-12-22 23:15:47 #定点突变

定点突变（Site-directed mutagenesis），经由设计好的寡核苷酸，在任何一个基因片段上进行随意或设计好的突变，也就是说，这种突变是预先设定好的，所以也有人将它称为“反遗传法”。定点突变由加拿大生化学家迈克尔·史密斯发明，他与PCR发明者凯利·穆利斯在1993年共同获得诺贝尔化学奖。根据生物学，基因会发生突变，突变可以自发也可以诱发。在定点突变法之前，突变株的产生必须经由自然界或用化学等方法让基因突变，这属于随机突变。而突变株必须在生物体上有所改变，才能确定有突变发生。突变位置必须利用分生或化学方法来确定。而定点突变法可经由设计好的寡核苷酸，在任何一个基因片段上进行随意或设计好的突变，也就是说，这种突变是预先设定好的。定点突变的基本流程需要合成一个短的 DNA 引子。其包含了目标突变，并且与突变位点附近的模板 DNA 互补以与目的基因的 DNA 杂交。突变可以是一个碱基的改变（点突变），多个碱基的改变，增加或者删除。这个引物接着被一个 DNA 聚合酶延展，拷贝剩下的基因。拷贝后的基因包含了突变位点，并以载体的形式引入宿主细胞，并被复制。最后，突变将通过 DNA 测序以确保包含了目标突变。原始的单引物延展法很低效，突变产量低。产物包含了原有的非突变模板以及突变链，突变及非突变后代混合在一起。此外，模板 DNA 经过甲基化，而突变链未经甲基化，由于偏爱甲基化模板 DNA 的错配修复系统的存在，导致突变数目进一步下降。因此，人们开发了许多新方法来提高突变效率。1.以有配对错误的单股DNA分子作为引物，此引物包含想要突变的核苷酸，与载体进行退火后，转化导入细胞内。 2.DNA双股使用DNA 聚合酶来延长，宿主会产生两种质体，进行克隆转译后即得到突变一个氨基酸的蛋白质。利用分子选殖的方法，可以改变基因上的特定碱基，送入载体之后，可在宿主中表现。亦可知道特定氨基酸的改变对蛋白质和酵素的影响。

相关

花生花生过敏（Peanut allergy）是对花生的食物过敏，和树坚果过敏不同。身体的过敏症状包括痒、荨麻疹、血管性水肿、皮肤炎、流鼻涕、哮喘、腹痛、低血压、腹泻，也可能会心搏停止。可
人力资本人力资本（英语：Human capital），指人的知识、经验、制度与习惯等。人力资本分成个人与社会两个方面，具备这些资本的劳工，拥有更高的生产能力，可以将这些资本转换成经济价值。人力资
Pm6s2 4f52, 8, 18, 23, 8, 2第一：540 kJ·mol−1 第二：1050 kJ·mol−1 第三：2150 kJ·mol主条目：钷的同位素钷是一种化学元素，符号为Pm，原子序61，属于镧系元素与稀土元素，它所有
广南省广南省（越南语：Tỉnh Quảng Nam／.mw-parser-output .han-nom{font-family:"Nom Na Tong","Han-Nom Gothic","Han-Nom Ming","HAN NOM A","HAN NOM B","Ming-Lt-HKSCS-UNI-H","
冠状动脉冠状血管（英语：Coronary artery）是心脏本身的血液供应系统，包括冠状动脉和冠状静脉。冠状血管如花冠状缠绕心脏。冠状动脉属于动脉，在主动脉瓣附近从主动脉分支出来，并分为左冠状
福乐智慧《福乐智慧》（维吾尔文：.mw-parser-output .font-uig{font-family:"UKIJ Tuz","UKIJ Nasq","UKIJ Basma","UKIJ_Mac Basma","UKIJ Zilwa","UKIJ Esliye","UKIJ Tuz Basma","UK
岩石学岩石学(英语：Petrology)是地质学的一个分支，是研究岩石的一门科学。岩石学主要研究岩石的化学成分、矿物成分、岩石的结构和构造，岩石的成因、变化规律、分布状况以及其实用的
Lisub2/subS硫化锂（Li2S），为锂的硫化物。白色至黄色晶体。在空气中吸收水分并水解，放出硫化氢气体。易溶于水，能溶于乙醇。具反萤石型结构。可被酸分解放出硫化氢；可与硝酸剧烈反应，但氢溴酸与
abbr class=abbr title=R26: 吸入剧毒R26/abbr警示性质标准词（英语：Risk Phrases，简写：R-phrases）是于《欧联指导标准67/548/EEC 附录III: 有关危险物品与其储备的特殊风险性质》里定义。该列表被集中并再出版于指导标准2001/
圣迭戈教士圣迭戈教士（英语：San Diego Padres）是一支在美国加利福尼亚州圣迭戈的美国职棒大联盟球队，隶属国家联盟西区。教士战绩一直很不理想，虽然1984年在国联冠军赛以3胜2败逆转淘汰芝加