定点突变

✍ dations ◷ 2025-08-28 17:12:41 #定点突变

定点突变（Site-directed mutagenesis），经由设计好的寡核苷酸，在任何一个基因片段上进行随意或设计好的突变，也就是说，这种突变是预先设定好的，所以也有人将它称为“反遗传法”。定点突变由加拿大生化学家迈克尔·史密斯发明，他与PCR发明者凯利·穆利斯在1993年共同获得诺贝尔化学奖。根据生物学，基因会发生突变，突变可以自发也可以诱发。在定点突变法之前，突变株的产生必须经由自然界或用化学等方法让基因突变，这属于随机突变。而突变株必须在生物体上有所改变，才能确定有突变发生。突变位置必须利用分生或化学方法来确定。而定点突变法可经由设计好的寡核苷酸，在任何一个基因片段上进行随意或设计好的突变，也就是说，这种突变是预先设定好的。定点突变的基本流程需要合成一个短的 DNA 引子。其包含了目标突变，并且与突变位点附近的模板 DNA 互补以与目的基因的 DNA 杂交。突变可以是一个碱基的改变（点突变），多个碱基的改变，增加或者删除。这个引物接着被一个 DNA 聚合酶延展，拷贝剩下的基因。拷贝后的基因包含了突变位点，并以载体的形式引入宿主细胞，并被复制。最后，突变将通过 DNA 测序以确保包含了目标突变。原始的单引物延展法很低效，突变产量低。产物包含了原有的非突变模板以及突变链，突变及非突变后代混合在一起。此外，模板 DNA 经过甲基化，而突变链未经甲基化，由于偏爱甲基化模板 DNA 的错配修复系统的存在，导致突变数目进一步下降。因此，人们开发了许多新方法来提高突变效率。1.以有配对错误的单股DNA分子作为引物，此引物包含想要突变的核苷酸，与载体进行退火后，转化导入细胞内。 2.DNA双股使用DNA 聚合酶来延长，宿主会产生两种质体，进行克隆转译后即得到突变一个氨基酸的蛋白质。利用分子选殖的方法，可以改变基因上的特定碱基，送入载体之后，可在宿主中表现。亦可知道特定氨基酸的改变对蛋白质和酵素的影响。

相关

ISO国际标准化组织（英语：International Organization for Standardization，简称：ISO）成立于1947年2月23日，制定全世界工商业国际标准的国际标准建立机构。ISO总部设于瑞士日内瓦，成员
肛瘘肛瘘是指直肠或肛管与肛周皮肤之间形成的瘘管。也称为肛门直肠瘘，但一般都称为肛瘘，古时又称为肛漏，先也有俗称“老鼠偷粪”。瘘管的内口多位于齿状线附近，而外口位于肛周皮肤。
脑控脑控是指代用电脑、无线电、电磁辐射（如微波听觉效应）、或其他科学技术手段，远程控制受害者的大脑精神、意识，即“Electronic harassment”所称的精神控制（Mind control）。脑控是
鱼油鱼油是自富含脂肪的鱼类体内取出的油脂。鱼油含ω-3脂肪酸（奥米茄3），主要是二十碳五烯酸（EPA）与二十二碳六烯酸（DHA），这些是可降低发炎反应的营养素。鱼类本身并不会制造ω-3脂肪酸，
东非大裂谷东非大裂谷（Great Rift Valley），位于非洲东部，是一个在3500万年前由非洲板块的地壳运动所形成的地理奇观，纵贯东非的大裂谷是世界上最大的断裂带，属于生长边界。其所形成的生态、
收养在古代罗马，领养男孩是很常见的事，尤其在上层社会元老院阶层中。罗马人普遍认为一个家庭至少要有一个男孩，因为家族需要一个男性继承人，但孩子又不能太多，原因是养育孩子的花费太
醋卡溴脲醋卡溴脲是Bayer于公元1917年发现的，在美国及欧洲做为安眠药及镇静剂之用。醋卡溴脲亦和白坚木的萃取物及维生素E组合用来治疗勃起功能障碍，在欧洲以Afrodor此一商标贩售。
泰坦巨蟒泰坦巨蚺属（学名：Titanoboa，意即“极大的蚺蛇”）是一个生活在古新世（约 6,000 至 5,800 万年前）的无毒、肉食性蚺类。已知的唯一种塞雷洪泰坦巨蚺（T. cerrejonensis）也是已知最大的
雪莉·安·杰克逊雪莉·安·杰克逊（英语：Shirley Ann Jackson，1946年8月5日－），美国物理学家，壬色列理工学院第 18 届院长，曾任总统情报顾问委员会（英语：President's Intelligence Advisory Board）（英语：Pr
菲力普·艾贝尔森菲力普·艾贝尔森（英语：Philip Abelson，1913年4月27日－2004年1月8日），美国物理学家。在华盛顿州立大学主修物理与化学，后于柏克莱加州大学获得核物理博士。他撰写了世界上第一篇如