定点突变

✍ dations ◷ 2025-04-25 08:50:59 #定点突变

定点突变（Site-directed mutagenesis），经由设计好的寡核苷酸，在任何一个基因片段上进行随意或设计好的突变，也就是说，这种突变是预先设定好的，所以也有人将它称为“反遗传法”。定点突变由加拿大生化学家迈克尔·史密斯发明，他与PCR发明者凯利·穆利斯在1993年共同获得诺贝尔化学奖。根据生物学，基因会发生突变，突变可以自发也可以诱发。在定点突变法之前，突变株的产生必须经由自然界或用化学等方法让基因突变，这属于随机突变。而突变株必须在生物体上有所改变，才能确定有突变发生。突变位置必须利用分生或化学方法来确定。而定点突变法可经由设计好的寡核苷酸，在任何一个基因片段上进行随意或设计好的突变，也就是说，这种突变是预先设定好的。定点突变的基本流程需要合成一个短的 DNA 引子。其包含了目标突变，并且与突变位点附近的模板 DNA 互补以与目的基因的 DNA 杂交。突变可以是一个碱基的改变（点突变），多个碱基的改变，增加或者删除。这个引物接着被一个 DNA 聚合酶延展，拷贝剩下的基因。拷贝后的基因包含了突变位点，并以载体的形式引入宿主细胞，并被复制。最后，突变将通过 DNA 测序以确保包含了目标突变。原始的单引物延展法很低效，突变产量低。产物包含了原有的非突变模板以及突变链，突变及非突变后代混合在一起。此外，模板 DNA 经过甲基化，而突变链未经甲基化，由于偏爱甲基化模板 DNA 的错配修复系统的存在，导致突变数目进一步下降。因此，人们开发了许多新方法来提高突变效率。1.以有配对错误的单股DNA分子作为引物，此引物包含想要突变的核苷酸，与载体进行退火后，转化导入细胞内。 2.DNA双股使用DNA 聚合酶来延长，宿主会产生两种质体，进行克隆转译后即得到突变一个氨基酸的蛋白质。利用分子选殖的方法，可以改变基因上的特定碱基，送入载体之后，可在宿主中表现。亦可知道特定氨基酸的改变对蛋白质和酵素的影响。

相关

少数寡关节炎（英语：oligoarthritis，源自希腊语oligos，即“少”或“寡”）是指在发病的前六个月内，关节炎影响到 2 到 4 个关节。若一次同时有五个或五个以上的关节发炎，则称为多关节炎；若
损害损害，是伦理及法律概念。伯纳德·格特（英语：Bernard Gert）将损害包括：
化学符号化学符号以拉丁字母缩写的形式表达化学元素或官能基。化学元素的符号通常为一个或两个字母，而一些人造元素的IUPAC临时符号则使用三个字母。元素的化学符号在元素周期表中使
十字架十字架曾作为一种古代死刑的刑具。《新约圣经》希腊文版圣经记载耶稣曾被犹太教宗教领袖拘送到罗马帝国驻犹太总督彼拉多，之后被判处此刑。所以基督十字也是基督教重要的象征
红灯区红灯区（英语：Red-light district），又称风月区、风化（花）区，是指以性产业为主的街区。在日本，红灯区称为风俗街（日语：風俗街／ふうぞくがい Fūzokugai）。中国古代至近代称为花柳巷、烟花
经典力学经典力学是力学的一个分支。经典力学是以牛顿运动定律为基础，在宏观世界和低速状态下，研究物体运动的基本学科。在物理学里，经典力学是最早被接受为力学的一个基本纲领。经典力
左塞尔左塞尔（Zoser）是埃及第三王朝最为著名的法老。他曾令其手下的官员，伊姆荷太普修建了埃及历史上的第一座金字塔——位于萨卡拉地区的左塞尔金字塔——作为他的陵墓。他的名字的
锡克教徒锡克人（英语：Sikh；旁遮普语：ਸਿੱਖ，sikkh 国际发音：.mw-parser-output .IPA{font-family:"Charis SIL","Doulos SIL","Linux Libertine","Segoe UI","Lucida Sans Unicode","Cod
波斯波斯园林（波斯语：باغ ایرانی‎）是一种源于波斯的园林设计风格。从安达卢西亚到印度，许多园林设计的风格都深受其印象。阿尔罕布拉宫的园林景观体现了自安达卢斯时期至
RNA → DNA结构 / ECOD（RNA-dependent DNA polymerase，RDDP）逆转录酶是一类存在于部分RNA病毒中具有逆转录活性、能以单链RNA为模板合成DNA的酶。由逆转录酶催化逆转录合成的DNA称为互补D