Southern印迹法

✍ dations ◷ 2025-11-21 11:59:44 #Southern印迹法
Southern印迹法,南方吸渍分析(英语:Southern blot),是由英国生物学家Sir Edwin Southern于1975年发明,并因此得名(Southern为南方之意),是一种普及的分子生物学实验技术。目的是侦测经由胶体电泳分离的样品中,含有特定序列的脱氧核糖核酸片段。通常,先利用胶体电泳分离脱氧核糖核酸(DNA)样本中各种不同大小的分子。不同大小的分子在胶体电泳之后,会分离而散布在胶体上不同的位置。接着,这些DNA分子可以利用虹吸作用,转染到一个薄膜上,经由DNA变性使它们的双股分开。因为双股DNA已经固定在薄膜上,所以变性后无法再形成双股螺旋;然后将上述薄膜暴露在杂交探针(probe)里,让探针和DNA杂交(hybridize)。探针是会产生放射线、或可以放出颜色或萤光的物质标记的单股DNA或核糖核酸(RNA)片段;最后是观察结果。薄膜上可以侦测到放射性或者萤光讯号的位置,就是含有可以与探针核酸序列进行偶合的脱氧核糖核酸样本散布的位置。类似的技术也被用来侦测经由胶体电泳分离的样品中,含有特定序列的RNA片段,当应用在RNA的侦测时,被称为Northern印迹法。Southern杂交是利用标记的探针(probe)与转印膜上把DNA片段进行杂交的技术,检测DNA片段中是否存在与探针同源的序列。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针(序列已知)进行特异性的靶序列检测。这里介绍两种常用的转印方法:毛细转印和电转印法。早期Southern blot是使用毛细转印法,经虹吸作用,转移到NC(硝酸纤维)膜上。转印法经过改良后,快速简便的电转印法如今应用的更加普遍。杂交前封闭膜上非特异性杂交位点,减少其对探针的非特异吸附。盐浓度、温度、次数、体积阳离子尼龙膜

相关

  • 呼吸短促呼吸困难(拉丁语:Dyspnea或Dyspnoea)、呼吸急促或空气饥是患者一种自觉症状,病人一般可自己觉察到呼吸困难,但外界不易观察出来。一般而言重体力劳动等带来的呼吸困难是正常症状,
  • 恶心恶心(英文:Nausea又称kalang或pinky),又称反胃,在医学上是指胃部不适或感到想呕吐的症状。恶心本身不是疾病,而是多种情况下产生症状,其中许多与胃有关。头晕可能会导致恶心。
  • 植物修复植物修复(英语:Phytoremediation,音标:/ˌfaɪtəʊrɪˌmiːdɪˈeɪʃən/) (Template:Ety) 是指利用植物修复受污染土壤的过程。植物修复是一种以植物为基础、具有成本效益的
  • 伊马替尼伊马替尼(INN:Imatinib;商品名Glivec,原称STI571,是诺华公司研发时的编号)是由瑞士诺华公司研制销售,治疗慢性骨髓性白血病,胃肠道基质肿瘤等癌症的第一代/旧一代靶向药物,格列卫(中文
  • 肝肾综合症肝肾综合征(英语:Hepatorenal syndrome,缩写HRS)是发生于肝硬化或急性肝衰竭患者的致命症状,患者的肾功能会快速恶化。虽然一些治疗方法(如透析)能延缓肝肾综合征的病程,但肝肾综合
  • 信息哲学信息哲学(philosophy of information)是哲学的一个与计算机科学、信息科学、信息技术和哲学相关的子领域它包含:信息哲学(PI)已经从人工智能哲学、信息逻辑、控制论、社会理论和
  • 盖革计数器盖革计数器(Geiger counter)又叫盖革-米勒计数器(Geiger-Müller counter,又译:盖革-牟勒计数器),是一种用于探测电离辐射的粒子探测器,通常用于探测α粒子和β粒子,也有些型号盖革计
  • 丹尼尔·加布里埃尔·华伦海特丹尼尔·加布里尔·华伦海特(德语:Daniel Gabriel Fahrenheit, 1686年5月14日-1736年9月16日),德国物理学家、工程师(虽然他基本定居在荷兰),华氏温标的创立者。华伦海特出生于但泽(
  • 岩石学岩石学(英语:Petrology)是地质学的一个分支,是研究岩石的一门科学。岩石学主要研究岩石的化学成分、矿物成分、岩石的结构和构造,岩石的成因、变化规律、分布状况以及其实用的
  • 华道夫-阿斯多里亚酒店华尔道夫酒店及度假村(英语:Waldorf Astoria Hotels & Resorts)是希尔顿全球酒店集团旗下的一家豪华度假酒店品牌。其被定位于希尔顿集团下的旗舰品牌,主打最高水准的设施和服务