Southern印迹法

✍ dations ◷ 2025-09-11 04:40:00 #Southern印迹法
Southern印迹法,南方吸渍分析(英语:Southern blot),是由英国生物学家Sir Edwin Southern于1975年发明,并因此得名(Southern为南方之意),是一种普及的分子生物学实验技术。目的是侦测经由胶体电泳分离的样品中,含有特定序列的脱氧核糖核酸片段。通常,先利用胶体电泳分离脱氧核糖核酸(DNA)样本中各种不同大小的分子。不同大小的分子在胶体电泳之后,会分离而散布在胶体上不同的位置。接着,这些DNA分子可以利用虹吸作用,转染到一个薄膜上,经由DNA变性使它们的双股分开。因为双股DNA已经固定在薄膜上,所以变性后无法再形成双股螺旋;然后将上述薄膜暴露在杂交探针(probe)里,让探针和DNA杂交(hybridize)。探针是会产生放射线、或可以放出颜色或萤光的物质标记的单股DNA或核糖核酸(RNA)片段;最后是观察结果。薄膜上可以侦测到放射性或者萤光讯号的位置,就是含有可以与探针核酸序列进行偶合的脱氧核糖核酸样本散布的位置。类似的技术也被用来侦测经由胶体电泳分离的样品中,含有特定序列的RNA片段,当应用在RNA的侦测时,被称为Northern印迹法。Southern杂交是利用标记的探针(probe)与转印膜上把DNA片段进行杂交的技术,检测DNA片段中是否存在与探针同源的序列。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针(序列已知)进行特异性的靶序列检测。这里介绍两种常用的转印方法:毛细转印和电转印法。早期Southern blot是使用毛细转印法,经虹吸作用,转移到NC(硝酸纤维)膜上。转印法经过改良后,快速简便的电转印法如今应用的更加普遍。杂交前封闭膜上非特异性杂交位点,减少其对探针的非特异吸附。盐浓度、温度、次数、体积阳离子尼龙膜

相关

  • 油,是由一种或多种液态的碳氢化合物组成的物质。由于油具有疏水性的特性,“油”亦是许多与水不溶之液体的总称。而可以在油中溶解的物质都具有亲油性,一般不溶于水。油和水可以
  • 联合国日联合国日,于1948年由联合国大会宣布设立,以纪念于联合国宪章生效三周年。联合国日定为每年10月24日。联合国日的设立是意图让人们记住联合国的目标和成就。联合国日是10月20日
  • 食品卫生食物卫生是指一系列与食物的进食、烹调及保存相关的卫生常识。日常因饮食而引起的问题,主要都是因为细菌在食物滋长,从而引致食物中毒。透过下列的方法对食物卫生作安全监管,可
  • 尿激酶尿激酶(英语:Urokinase)由肾脏生成,可直接激活纤维蛋白溶酶原转变成纤溶酶。尿激酶是从尿中提取的第一代天然溶栓药。EC 1.1/2/3/4/5/6/7/8/9/10/11/12/13/14/15/16/17/18/19/20
  • 帕扎尔帕扎尔是土耳其的城镇,由里泽省负责管辖,位于该国东北部,距离首府里泽37公里,面积315平方公里,海拔高度37米,主要经济活动有种植茶叶、渔业、贸易业和农业,2011年人口15,698。
  • 三立新闻三立新闻台(英语:SET News Channel),简称“三立新闻”,是台湾三立电视旗下的电视新闻频道,1998年3月3日开播,是台湾多家24小时即时播出的新闻频道之一。原名SET电视台,后改为SETN,200
  • 未解的问题尚未解决的语言学问题(List of unsolved problems in linguistics)列举了语言学中十分关键但仍待解决的诸多问题,内容如下。以下所示问题中,既有目前已被公认无解的问题,也有已解
  • 分子云分子云(英语:Molecular cloud 或 Stellar nursery)是星际云的一种,主要是由气体和固态微尘所组成。其规模没有一定的范围,直径最大可超过100光年,总质量可达太阳的 106 倍。氢分子
  • 日本清酒日本酒(日语:日本酒/にほんしゅ Nihon syu),指日本传统的酒精饮料,一般用来特指日本最具代表性的酒类,清酒。主要以米为原料,以日本传统制法制成,属于酿造酒。以日本特有制法制成的
  • 一万五千多年前人类在何时以何种方式迁入美洲的问题,引发了人类学家和考古学家巨大的兴趣,并且成为几个世纪以来一直争论不休的话题。学术界给出了许多古印地安人在美洲定居的模型。现代生物