首页 >
Southern印迹法
✍ dations ◷ 2025-07-02 09:41:37 #Southern印迹法
Southern印迹法,南方吸渍分析(英语:Southern blot),是由英国生物学家Sir Edwin Southern于1975年发明,并因此得名(Southern为南方之意),是一种普及的分子生物学实验技术。目的是侦测经由胶体电泳分离的样品中,含有特定序列的脱氧核糖核酸片段。通常,先利用胶体电泳分离脱氧核糖核酸(DNA)样本中各种不同大小的分子。不同大小的分子在胶体电泳之后,会分离而散布在胶体上不同的位置。接着,这些DNA分子可以利用虹吸作用,转染到一个薄膜上,经由DNA变性使它们的双股分开。因为双股DNA已经固定在薄膜上,所以变性后无法再形成双股螺旋;然后将上述薄膜暴露在杂交探针(probe)里,让探针和DNA杂交(hybridize)。探针是会产生放射线、或可以放出颜色或萤光的物质标记的单股DNA或核糖核酸(RNA)片段;最后是观察结果。薄膜上可以侦测到放射性或者萤光讯号的位置,就是含有可以与探针核酸序列进行偶合的脱氧核糖核酸样本散布的位置。类似的技术也被用来侦测经由胶体电泳分离的样品中,含有特定序列的RNA片段,当应用在RNA的侦测时,被称为Northern印迹法。Southern杂交是利用标记的探针(probe)与转印膜上把DNA片段进行杂交的技术,检测DNA片段中是否存在与探针同源的序列。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针(序列已知)进行特异性的靶序列检测。这里介绍两种常用的转印方法:毛细转印和电转印法。早期Southern blot是使用毛细转印法,经虹吸作用,转移到NC(硝酸纤维)膜上。转印法经过改良后,快速简便的电转印法如今应用的更加普遍。杂交前封闭膜上非特异性杂交位点,减少其对探针的非特异吸附。盐浓度、温度、次数、体积阳离子尼龙膜
相关
- 原生生物界超类群与门以及众多不同分类会包括的分类单元原生生物(学名:Protist,发音: /ˈproʊtᵻst/)统称真核生物域中,不属于植物、动物和真菌,一般个体微小、多数为单细胞、有细胞核和原生
- 次氯酸钠次氯酸钠(sodium hypochlorite),化学式NaClO,是钠的次氯酸盐。次氯酸钠与二氧化碳反应产生的次氯酸是漂白剂有的成分。氯气溶于冷而且稀的氢氧化钠溶液产生次氯酸钠、氯化钠及水
- 磷脂酶磷脂酶(英语:Phospholipase)是一种将磷脂质水解为脂肪酸及亲脂性物质的酵素。磷脂酶主要依据其催化反应的对象分为四类,即磷脂酶A、B、C、D四种。磷脂酶A1-切SN-1酰基 磷脂酶A2-切
- 卢·蒙特利卢·蒙特利(英语:Louis J. Montulli II)是一位以开发网页浏览器而闻名的程序员。在1991年和1992年,他与堪萨斯大学的迈克尔·格罗贝兹和查尔斯·雷扎克合作开发了一个名为Lynx的
- 药物滥用物质滥用(英语:Substance abuse)广义上也被称为药物滥用(英语:drug abuse),药物滥用是指经常用于临床效力的处方药使用,但是滥用潜力和已知的反作用与不适当使用联系在一起,比如有镇
- 反恐反恐字面意思为反对恐怖主义,亦可以指向:
- 肌动蛋白解聚因子肌动蛋白解聚因子(英语:Actin depolymerizing factors)是一个微丝蛋白家族, 用于调节肌动蛋白的装配与解聚。
- 豆饼豆饼可以指:
- 异步通信异步通信(英语:Asynchronous conferencing)是科学领域中正式使用的术语,特指以计算机为介质,沟通,协作和学习,在互动贡献者中有一定延迟的技术。与之相对的是同步通信,同步会议指各
- 酵素工程学酶工程(英语:Enzyme engineering)又可以说是蛋白质工程学,利用传统突变技术或是分子生物学技术,将蛋白质上的氨基酸进行突变,已改变蛋白质之化学性质和功能。例如:在酵素的应用上,